新葡萄8883官网AMG在生物医疗领域中，病毒感染预实验是一项重要的研究步骤。本实验以24孔培养板为例，旨在对目的细胞和工具细胞进行感染预实验。工具细胞可选用293T（人胚肾上皮细胞）、H1299（人肺癌细胞）或其他合适的细胞类型。实验所需材料包括：培养基、24孔培养板、移液枪、枪头、EP管、细胞计数板、冰盒及废液缸等。根据所选目的细胞的特性，可以适量使用Polybrene以提高感染效率。

Day 1：首先，准备细胞。将细胞培养至对数生长期，并利用胰酶消化后计数。根据细胞计数测定细胞密度，每孔接种5×10⁴个细胞，并添加500µL细胞培养液。在一般情况下，H1299或293T细胞在感染后第3天可达到80%-90%融合度。在接种目的细胞时，请根据其生长速度调整接种量，以确保第3天同样达到80%-90%融合度。

Day 2：接下来，准备慢病毒颗粒。首先计算所需的慢病毒颗粒量，取出冻存在-80℃的病毒颗粒，进行冰浴融化。随后，观察培养箱中的细胞状态及融合度，若细胞情况良好，则开始实验流程：
A. 小心吸去24孔板中的旧培养液，加入新的完全培养液；
B. 向细胞中加入计算好的慢病毒颗粒液，并轻轻以划8字的方式在工作台上混匀；
C. 混匀后，将细胞培养板放置于37℃、5% CO₂培养箱中过夜。

Day 3：经过12-16小时的感染后，需更换培养液。将含慢病毒颗粒的培养液吸出，再向培养板中添加含5%灭活FBS（胎牛血清）的新培养液，继续培养。注意，目的细胞的感染时长需调整，部分细胞不宜感染超过12小时。

Day 4：继续培养细胞，并观察细胞状态是否出现异常。

Day 5：对慢病毒颗粒的感染效率进行观察与评估。将24孔培养板盖好，使用70%乙醇清洁培养板外壁，之后在倒置荧光显微镜下观察荧光表达，拍照并估计慢病毒颗粒对细胞的感染效率。如果慢病毒颗粒携带的基因表达所需时间较长，可建议在72或96小时后进行荧光观察。根据荧光表现，可以初步探索出目的细胞的MOI值，为后续实验奠定基础。这一系列实验均可借助新葡萄8883官网AMG的优化系统进行，更加精确和高效。