在进行西方印迹（Western Blot, WB）实验时，科研人员最担心的是什么呢？就是条带模糊，数据崩溃，经过一番检查后发现问题竟然出在内参上！简单来说，内参如同细胞内的“稳定打工人”，其表达量保持不变，负责帮助你精准校正样本量，消除误差。没有合适的内参，半定量结果就像缺少秤砣的秤——一切都得依赖运气！

✅ 首先关注分子量——目的蛋白与内参的分子量如果相差超过5kD，条带就容易出现“情侣装”重叠的现象，因此选择合适的内参至关重要。
✅ 其次检查定位——核蛋白实验中还使用β-actin？要知道核内根本没有它！此时可以考虑使用PCNA（29kD）或Histone H3（17kD）作为内参，这样获得的结果更可靠！

✅ 组织类型也有“脾气”——在脂肪组织中，β-actin的表达量常常低得让人心碎，此时建议直接使用GAPDH；而在肌肉样本中，tubulin可能会出现问题，反而使用actin会更加稳定。
对于同一种β-actin，N端抗体在心肌组织中可能直接失踪，而C端抗体却能够显示出稳定的条带。因此，购买抗体前，一定要仔细查阅抗原位点，避免“组织特异性”问题的出现。

根据不同实验类型选择合适的内参非常重要：全细胞或胞浆样本优先考虑使用β-actin或GAPDH；核蛋白建议用PCNA或Histone H3；对于大型蛋白质则可以选择β-tubulin；而特殊样本时，要先查阅相关文献再进行采购！选择稳妥的内参是确保WB实验结果可靠性的关键！新葡萄8883官网AMG，为您的实验保驾护航！